酸性蛋白酶測定試劑盒的使用步驟:
1、用Hanks液配制0.1%臺盼藍(lán)溶液;
2、用0.5%胰蛋白酶:0.2%EDTA=1:1混合液來消化培養(yǎng)的貼壁細(xì)胞;
3、再加入適量Hanks液制成細(xì)胞懸液;
4、將待染色細(xì)胞稀釋至所需濃度;
5、每0.1ml細(xì)胞懸液約加新鮮配制的染液一小滴,室溫下染3—5min;
6、染色過的細(xì)胞材料,取一滴細(xì)胞懸液置玻片上,加蓋玻片后放高倍鏡下觀察;
7、死亡的細(xì)胞著淺藍(lán)色并膨大,無光澤?;罴?xì)胞不著色并保持正常形態(tài),有光澤;
8、計(jì)數(shù)1000個(gè)細(xì)胞中的活細(xì)胞和死細(xì)胞數(shù)目;
9、統(tǒng)計(jì)未染色細(xì)胞??砂垂接?jì)算出細(xì)胞活率。
酸性蛋白酶測定試劑盒的注意事項(xiàng):
1、如儀器無本試劑盒要求的波長,請選擇接近的波長。
2、不同批次的試劑不推薦混合使用。
3、使用時(shí)請做好防護(hù)措施并嚴(yán)格執(zhí)行實(shí)驗(yàn)操作規(guī)程。且廢液按環(huán)保要求處理。
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