產(chǎn)品名稱:膠原酶Ⅰ 細(xì)胞培養(yǎng)試劑
產(chǎn)品型號(hào):C8140
產(chǎn)品特點(diǎn):膠原酶Ⅰ 細(xì)胞培養(yǎng)試劑可以用 TESCA buffer (50 mM TES,0.36 mM 氯化鈣,pH 7.4,37°C)配制成 1-2 mg/ml。 也可以用含鈣鎂的 PBS、含鈣鎂的 hanks 或不含血清的培養(yǎng)基配制。配完后分裝,避免反復(fù)凍融。
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膠原酶Ⅰ 細(xì)胞培養(yǎng)試劑
膠原酶Ⅰ用于上皮、肺,脂肪和腎上腺組織細(xì)胞的分離
膠原蛋白酶 來源于溶組織梭菌
膠原酶Ⅰ可以用 TESCA buffer (50 mM TES,0.36 mM 氯化鈣,pH 7.4,37°C)配制成 1-2 mg/ml。 也可以用含鈣鎂的 PBS、含鈣鎂的 hanks 或不含血清的培養(yǎng)基配制。配完后分裝,避免反復(fù)凍融。
1 個(gè)膠原消化單位(CDU):在 pH 7.4,37℃以及鈣離子存在的條件下,以每5小時(shí)從膠原中 釋放的多肽相當(dāng)于茚三酮顯色1微摩爾亮氨酸量為一個(gè)活性單位。
1FALGPA 單位:在 pH 7.5、25℃以及鈣離子存在的條件下,一個(gè) FALGPA 水解單位每分鐘 可水解 1.0μmol 呋喃基丙烯?;?Leu-Gly-Pro-Ala。
為粗品,用于上皮、肺,脂肪和腎上腺組織細(xì)胞的分離。外觀為黑棕色粉末。分子量68,000 到125,000,適PH為6.3-8.8。膠原酶能夠特異性結(jié)合-R-Pro-8-X-Gly-Pro-R-序列中的中性氨基酸(X) 和甘氨酸之間的肽鍵。該粗品是溶組織梭菌分泌的混合酶。主要為膠原酶、中性蛋白酶和梭菌蛋白 酶。其中梭菌蛋白酶是被氧化的、不活潑的酶,組織的分離必須依靠膠原酶和中性蛋白酶兩者共 同作用。
激活劑:Ca2+,適合濃度為5 mM。
抑制劑:EGTA、還原性谷胱甘肽、β-巰基乙醇、巰基乙酸鈉、8-羥基喹啉、2,2'-聯(lián)吡啶等。
底物:不同類型的膠原是其天然底物,而一些合成的多肽也可以作為其底物,比如: N-CBZ-gly-pro-gly-gly-pro-ala (Km = 0.71 mM)、N-CBZ-gly-pro-leu-gly-pro、N-(3-(2-furyl)acryloyl)- leu-gly-pro-ala(FALGPA)、4-Phenylazo benzyloxycarbonyl-pro-leu-gly-pro-D-arg、N-2,4-Dinitrophenyl- pro-gln-gly-ile-ala-gly-gln-D-arg。除此之外N-Succinyl-gly-pro-leu-glypro7-amido-4-methylcoumarin是 類膠原酶的肽酶的底物。N-(2,4-Dinitrophenyl)-proleu-gly-leu-trp-ala-D-arg 氨基酸化合物是脊椎動(dòng)物 膠原酶的底物。
膠原酶Ⅰ 細(xì)胞培養(yǎng)試劑
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