產品名稱:蛋白質定量試劑 Lowry法蛋白濃度測定試劑盒
產品型號:PC0030
產品特點:蛋白質定量試劑 Lowry法蛋白濃度測定試劑盒貨號 :PC0030規(guī)格 :1000T(微孔)保存 :BSA 蛋白標準品 4℃保存有效期少 3 個月,-20℃保存有效期少一年,其他試劑室溫保存有效期少一年。試劑開封使用后請及時密閉保存,F(xiàn)olin 酚乙試劑顏色變成深綠色即失效。
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蛋白質定量試劑 Lowry法蛋白濃度測定試劑盒
貨號 :PC0030
規(guī)格 :1000T(微孔)
保存 :BSA 蛋白標準品 4℃保存有效期少 3 個月,-20℃保存有效期少一年,其他試劑室溫保存有效期少一年。試劑開封使用后請及時密閉保存,F(xiàn)olin 酚乙試劑顏色變成深綠色即失效。
產品組成 :
Folin 酚甲試劑 A | 100ml×2 |
Folin 酚甲試劑 B | 5ml |
Folin 酚乙試劑(1N) | 20ml |
PBS 稀釋液 | 30ml |
BSA 蛋白標準品 (5mg/ml ) | 1ml |
產品簡介 :
Folin-酚試劑法包括兩步反應:*步是在堿性條件下,蛋白質與銅作用生成蛋白質-銅絡合物;第二步是此絡合物將 Folin 試劑還原, 產生深藍色, 顏色深淺與蛋白質含量成正比。 定量范圍為 5~100µg/ml 蛋白質。
Folin 試劑顯色反應由酪氨酸、色氨酸和半胱氨酸引起,因此樣品中若含有酚類、檸檬酸和巰基化合物均有干擾作用。此外,不同蛋白質因酪氨酸、色氨酸含量不同而使顯色強度稍有不同。
操作說明 :
1.根據(jù)需要量,取適量 Folin 酚甲試劑 A 和 B 按 50:1 混合,混合后有效期為 24 小時,過期失效。
2.根據(jù)需要量,取適量 BSA 標準品用 PBS 稀釋稀釋 10 倍濃度 0.5mg/ml。
若采用酶標儀法(96 孔)
3.將標準品按 0, 2, 4, 6, 8, 12, 16, 20ul 加到 96 孔板中,加 PBS 補足到 20ul。
4.將樣品作適當稀釋(好多做幾個梯度),加 20ul 到 96 孔板的樣品孔中。由于移液器在取小量時的誤差,標準線前面的點誤差比較大,所以盡可能的讓樣品點落在標準線 1/2 后。
5.將配好的 Folin 酚甲試劑每孔加入 200ul,輕輕震動,混勻,室溫放置 10 分鐘。
6.各孔加入 20 微升 Folin 酚乙試劑,迅速混勻,37℃放置 30 分鐘。用酶標儀測定 A650 計算蛋白濃度。
若采用分光光度計法(接上述步驟 2)
3.取八支(或者更多)5ml 離心管,標號,按 下表加入試劑。
4.混勻,37℃放置 30 分鐘。分光光度計測定 A650 計算蛋白濃度。
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參考文獻:
《CtBP2可通過c-Myc信號傳導促進前列腺癌細胞增殖》 作者:昌文張詔郜勇徐志宏張 期刊:基因 影響因子:7.463 PMID:
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