產(chǎn)品名稱:免疫組化 DAB顯色試劑盒
產(chǎn)品型號(hào):DA1010
產(chǎn)品特點(diǎn):免疫組化 DAB顯色試劑盒貨號(hào):DA1010規(guī)格:3ml 10ml保存:-20℃避光密閉保存,一年有效。避免反復(fù)凍融。短期可 2-8℃保存。
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免疫組化 DAB顯色試劑盒
貨號(hào):DA1010
規(guī)格:3ml 10ml
保存:
-20℃避光密閉保存,一年有效。避免反復(fù)凍融。短期可 2-8℃保存。
產(chǎn)品說明:
二氨基聯(lián)苯胺(Diaminobenzidine,DAB)是過氧化物酶(POD)的底物,DAB 顯色液主要用于免疫過氧化物酶法,適用于辣根過氧化物酶 HRP 標(biāo)記的免疫印記或免疫組化反應(yīng)。過氧化物酶使底物發(fā)生反應(yīng),于反應(yīng)部位產(chǎn)生棕色沉淀物。免疫印記可直接在膜上顯示條帶。免疫組化標(biāo)本顯色時(shí)間一般為室溫 5-20 分鐘,隨后在顯微鏡下觀察顯色qing況,顯色充分后應(yīng)將標(biāo)本及時(shí)脫水封固。其終產(chǎn)物可直接在光鏡下觀察,也可經(jīng) OsO4 處理后,增加反應(yīng)產(chǎn)物的電子密度,用于電鏡觀察。
操作說明:
1. 對(duì)于組織切片或蛋白質(zhì)印記膜,在與辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的抗體或其它形式的探針孵育后,用適當(dāng)洗滌液洗滌 3-5 次,每次 3-5 分鐘。
2. 取 900ul PBS(或雙蒸水) ,加入 50ul 溶液 A,50ul 溶液 B 混合均勻,即配成 DAB 工作液。如需要更大體積工作液,可按比例放大。此溶液必須現(xiàn)用現(xiàn)配,配好后避光保存,1 小時(shí)內(nèi)使用,過期后請(qǐng)將剩余的液體廢棄。
3. 向組織切片或膜上加入適量 DAB 工作液,確保能充分覆蓋樣品。
4. 室溫避光孵育 3-10 分鐘或更長(zhǎng)時(shí)間,避免光照,直顯色預(yù)期深淺。
5. 去除 DAB 染色工作液,用蒸餾水洗滌 2-3 次即可終止顯色反應(yīng)。
6. 對(duì)于組織切片或細(xì)胞樣品,顯色反應(yīng)終止后,可對(duì)其進(jìn)行其他染料復(fù)染。對(duì)于膜,顯色反應(yīng)終止后,可以室溫晾干避光保存。
注意事項(xiàng):
1.DAB 溶液應(yīng)低溫密封保存。如有結(jié)晶析出,應(yīng)確保結(jié)晶*溶解再行使用;
2.顯色工作液應(yīng)現(xiàn)用現(xiàn)配,新鮮配制的工作液應(yīng)為無色或淺棕色,如顏色過深,請(qǐng)勿使用;
3.顯色時(shí)間嚴(yán)格控制,根據(jù)情況調(diào)整,以免顯色過度。固相膜顯色數(shù)小時(shí)后即會(huì)褪色,不能*存在;
4.DAB 為可疑致癌物,請(qǐng)采取必要的防范措施。操作時(shí)應(yīng)戴手套,盡量避免與皮膚接觸,用后及時(shí)*沖洗,接觸 DAB 的實(shí)驗(yàn)用品好經(jīng)洗液浸泡 24h 后使用。
免疫組化 DAB顯色試劑盒
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相關(guān)文獻(xiàn):
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